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发布日期：2024-06-29 06:52 点击次数：74
碧云天研发坐褥的 Fluorescence in Situ Hybridization Kit for RNA (FISH Kit for RNA)，即荧光原位杂交RNA检测试剂盒，是一种通过将荧光标记的寡核酸探针(DNA或RNA)与细胞或组织中的办法RNA按碱基互补配对旨趣进行杂交，造成荧光标记核酸探针与办法RNA的杂交复合物，随后就不错在荧显豁微镜下不雅察并详情办法RNA细胞内定位的高贤慧度检测试剂盒。
本试剂盒操作大略苟简。常常一天内即可完成检测。本试剂盒所使用的荧光标记核酸探针与靶RNA造成杂交复合物后，就不错平直进行荧光不雅察。
本试剂盒配景低、贤慧度高。本试剂盒提供了颠倒的乙酰化试剂，况且提供了特等的禁闭试剂Yeast RNA (100X)，能灵验裁汰配景，培植检测贤慧度。
本试剂盒样品适用限制广。本试剂盒可用于多聚甲醛或福尔马林固定的组织、石蜡或冰冻切片以及细胞等样本的靶RNA的定位分析。本试剂盒适用于样品的异质性(sample heterogeneity)检测，非编码RNA (包括miRNA和lncRNA等)的单细胞水平的高贤慧度检测，基因组起原RNA的跟踪检测以及办法RNA的高通量单细胞定量检测(high-throughput single-cell quantitation)。
本试剂盒不错提供办法RNA的单细胞空间漫衍信息。基因的抒发分析常常取舍转录组测序、qPCR、Northern、基因微阵列芯片等时代[1]，尽管这些时代提供了大齐信息，但这些检测技艺很容易遮蔽单细胞基因抒发的各别性，格外是RNA在细胞内的空间漫衍特质，取舍本试剂盒不错特异且高贤慧地揭示单细胞水平基因抒发的空间漫衍情况。
本试剂盒兼容后续荧光染色。本试剂盒具有较好的荧光兼容性，除特异杂交的荧光探针信番外，还不错合营DAPI (C1002/C1005/C1006)， Hoechst 33342染色液(C1025/C1026)， Hoechst 33258染色液(C1017/C1018)， Propidium Iodide (ST511/ST512)等荧光染料。
www.accecon.xyz碧云天Fluorescence in Situ Hybridization Kit for RNA使用Cy3标记的红色荧光探针检测Hela细胞18S rRNA的原位杂交兑现请参考图1。
图1. 碧云天研发坐褥的Fluorescence in Situ Hybridization Kit for RNA (R0306)用于Hela 细胞18S rRNA的荧光原位杂交(FISH)检测兑现图。图A为使用阴性对照探针0.5µg/ml Cy3-18S rRNA sense probe的FISH检测兑现图，图B为DAPI染色兑现图，图C为图A和图B的重叠图兑现；图D为使用阳性红色荧光探针0.5µg/ml 18S rRNA Cy3 FISH Probe (R0312)即Cy3-18S rRNA antisense probe的FISH检测兑现图，图E为DAPI染色兑现图，图F为图D和图E的重叠兑现图。Scale Bar均为20µm。内容兑现会因推行条款、检测仪器等的不同而存在各别，图中兑现仅供参考。
包装清单： 保存条款：-20℃保存，一年灵验。Proteinase K (20mg/ml)和Yeast RNA (100X)须-20℃保存；Hybridization Solution和DAPI须-20℃避光保存；Acetylation Solution A， Acetylation Solution B和Wash Buffer (20X)可4℃或室温保存。
能管事项：提议尽量使用清新样品进行FISH检测，固定后保存的样品，RNA常常会跟着时辰的延迟而渐渐发生降解，影响FISH的检测兑现。
需要自备的试剂：BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free， Sterile) (ST876)或DEPC水(R0021/R0022)、4%多聚甲醛固定液(P0099)、PBS， pH7.3 (DNase， RNase & Protease free， Sterile) (ST447)、盐酸、Formamide deionized、抗荧光淬灭封片液(P0126)、多聚赖氨酸(C0312/C0313/ST508/ST509) (酌情自备)、盖玻片(FCGF24/FCGF22) (酌情自备)、冰冻或石蜡切片干系试剂(酌情自备)、办法RNA荧光探针(须自行购买或合成)。
关于成例的哺乳动物细胞或组织样品的检测，Hybridization Solution使用前去往不错添加Yeast RNA后使用，不错灵验裁汰配景。关于Yeast RNA可能产生干豫的情况，不错不添加Yeast RNA。
提议Hybridization Solution相宜分装后避光保存。
预杂交温度详情后，常常后续的探针预解决、杂交、洗涤的温度宜保捏一致。
任何一种试剂齐必须沿途解冻并混匀后使用。
由于触及 RNA 操作，需要严格按照 RNA 操作的程序进行，幸免 RNase 轻侮。推行顶用到的吸头、离心管和检测触及的用具和干系溶液齐必须是无RNA酶轻侮的(RNase free)。推选使用碧云天坐褥的BeyoGold™系列中明确标注RNase free的耗材居品。推行顶用到的玻璃或塑料用具、仪器缔造、桌面等名义也尽量进行RNase free解决。推选清洗或擦抹后使用碧云天坐褥的R0127 RNase， DNase， RNA and DNA Away参考居品讲明书通过喷雾解决快速、苟简、高效地撤销推行仪器、缔造、用具名义的RNase轻侮。RNase， DNase， RNA and DNA Away解决后，仪器缔造等名义不错使用洁净纸巾擦抹干净，和样品平直战役的用具名义不错使用不含RNase的超纯水相宜冲洗数次。不含RNase的超纯水推选使用碧云天的ST876 BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free， Sterile)或R0021/R0022 DEPC水(DNase、RNase free)。
推选使用R0312 18S rRNA Cy3 FISH Probe或R0323 U6 snRNA Cy3 FISH Probe行为阳性对照，别离不错对细胞浆中的18S rRNA或细胞核中的U6 snRNA进行荧光染色。
本居品仅限于专科东说念主员的科学狡计用，不得用于临床会诊或治愈，不得用于食物或药品，不得存放于等闲住宅内。
⏰旅程时长20分钟，全长5.7公里，设计分成三段，需要拐弯两次
为了您的安全和健康韩国苹果id账号(带密保)谁有，请穿推行服并戴一次性手套操作。